IMUBIND® Factor VIIa ELISA

Le test IMUBIND FVIIa ELISA utilise un inhibiteur d'enzyme biotinylé du FVIIa et un anticorps monoclonal anti-FVII / FVIIa comme anticorps de capture. Des échantillons de plasma dilués ou des surnageants contenant du FVIIa sont incubés avec l'inhibiteur biotinylé, qui se fixe de manière covalente au FVIIa mais pas au FVII.
Les échantillons sont ajoutés au micropuits recouverts de l'anticorps monoclonal de capture. Le FVIIa est détecté grace à la streptavidine-HRP qui va lier le complexe FVIIa capté au fond du puit par l'anticorps monoclonal et l'inhibiteur du FVIIa biotinylé.
Le TMB va ainsi reconnaître le HRP donnant un composé bleu qui sera arrêté par ajout d'acide sulfurique donnant un composé jaune, mesuré à 450nm. Les résultats seront comparés avec une courbe d'étalonnage de FVIIa connue.

Le facteur VII (FVII) est une glycoprotéine synthétisée par le foie, vitamine k dependante.
Lorsque le facteur tissulaire (FT) apparaît à la surface de l'endothélium vasculaire lésé, anormal ou activé, le FVIIa s'y associe, initiant la voie
extrinsèque de la coagulation.
Le complexe FT-FVIIa active le FX en FXa et le FIX en FIXa.